Определение группы крови и резус фактора

/ 29

29 Методы определения групп крови и резус-фактора. Профилактика возможных ошибок

Определение групп крови с помощью стандартных сывороток. В лунки планшета для определения групп крови последовательно наносят пипетками по одной крупной капле стандартной сыворотки групп 0(1), А(П), В(Ш) двух различных серий каждой группы. Затем наносят в каждую лупку по капле исследуемой крови, в 5 — 10 раз меньшую сыворотки. Сухими стеклянными палочками или путем покачивания планшета смешивают стандартные сыворотки и исследуемую кровь. Через 5 минут оценивают результат (табл. 2).

Таблица 2

Определение групп крови с помощью стандартных сывороток

Группа исследуемой крови	Стандартные сыворотки
	0(I)	А(II)	В (III)
0(I)	-	-	-
А(II)	+	-	+
В(III)	+	+	-
AB(IV)	+	+	+

Определение групп крови по стандартным эритроцитам. В лунки планшета наносят большие капли плазмы исследуемой крови. Рядом с каждой каплей плазмы последовательно наносят по небольшой капле стандартных эритроцитов групп 0(1), А(II), В(III). Капли перемешивают покачиванием планшета. Через 5 минут к каждой капле смеси добавляют по 1 капле физиологического раствора и учитывают результат.

Таблица 3

Определение групп крови с помощью стандартных эритроцитов

Группа исследуемой крови	Стандартные эритроциты
	0(I)	А(II)	В (III)
0(I)	-	+	+
А(II)	-	-	+
В(III)	-	+	-
AB(IV)	-	-	-

Определение резус-фактора. На дно сухой пробирки наносят 1 большую каплю универсального реагента анти-резус, затем добавляют такую же каплю исследуемой крови. После встряхивания пробирки производят перемешивание сыворотки анти-резус и крови в течение 5 минут по стенкам пробирки, после чего добавляют 5 — 7 мл физиологического раствора. Наличие агглютинации свидетельствует о присутствии резус-фактора.

Определение групп крови с помощью цоликлонов. Цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВО в прямых реакциях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками.

Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготовляются из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом. Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти-А и анти-В антител.

Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах объемом 5 — 10 мл. Цоликлон анти-А — желтого цвета, анти-В — синего, анти-АВ — бесцветный. В качестве консерванта применяется азид натрия.

Техника определения групп крови. Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта, в том числе из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на пластине или планшете, определение производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 — 25 X.

Наносят на пластину или планшет индивидуальными пипетками цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями.
Рядом с каплями антител наносят по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01 — 0,03 мл).
Смешивают кровь с реагентом, покачивая планшет.
Наблюдают за ходом реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании планшета в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3 — 5 секунд, но наблюдение следует вести 3 минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.
Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агтлютинаты видны в виде мелких красных агретатов, быстро смешивающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
Интерпретация результатов реакции агглютинации с цоликлонами представлена в табл. 4.

Таблица 4

Определение групп крови с помощью цоликлонов

Группа исследуемой крови	Стандартные эритроциты
	Анти-А	Анти-В	Анти-АВ
0(I)	_	_	-
А(II)	+	-	+
В(III)	-	+	+
АВ(IV)	+	+	+

Примечание: знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) — се отсутствие

При положительном результате реакции агглютинации со всеми гремя цоликлонами необходимо исключить спонтанную неспецифическую аглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого смешивают на плоскости 1 каплю исследуемых эритроцитов с каплей физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.

Определение резус-фактора с помощью цоликлона. В лупку планшета наносят 1 большую каплю цоликлона анти-Д-супер_т рядом наносят 1 маленькую каплю исследуемой крови.

Покачивая планшет, смешивают кровь с цоликлоном. За ходом реакции наблюдают в течение 3 минут. Наличие агглютинации свидетельствует о присутствии резус-фактора.

StudFiles.ru

Группа крови и резус-фактор: определение и совместимость

Каждый из нас знает свои группу крови и резус-фактор. Многие помнят эту информацию с детства, некоторые узнают ее после сдачи анализов. При беременности, планировании ребенка и переливании группа крови и резус-фактор являются чуть ли не самыми важными показателями. Именно о них и пойдет речь в данной статье. Из нее вы узнаете о том, что такое группы крови человека, резус-фактор. Подробно будет рассмотрен вопрос совместимости и возможных последствий.

Немного истории

Раньше люди не задумывались над тем, что такое кровь. Они даже не подозревали, что красная жидкость в венах бывает разной. В давние времена люди не знали, что такое группа крови и резус-фактор. Впервые об этом заговорили в 1901 году. Тогда ученый Карл Ландштейнер определил, что кровь у всех разная. Он взял анализ у своих сотрудников и отделил сыворотку от кровяных телец-эритроцитов. Он смешивал пробы и увидел, что некоторые виды крови принимают чужие эритроциты, а другие, наоборот, дают необычную реакцию. При смешивании тельца склеивались, и получался осадок. На основе этих исследований ученый определил, что у человека может быть три вида крови. Он назвал их А, В и О. Четвертую группу исследователь определил как сомнительную и не включил в общий список. Через несколько лет догадки Ландштейнера подтвердил другой ученый - Я. Янский. А двадцатью годами позже группа крови и резус-фактор уже носили привычные обозначения. Ими мы пользуемся до сих пор. Конечно, сто лет назад никто не знал, что такое совместимость групп крови и резусов, однако именно в те годы было положено начало формирования современной медицины.

Определяем группу крови и резус-фактор

Чтобы говорить о совместимости, нужно разобраться с основными понятиями. Группы крови человека, резус-фактор определяются с помощью лабораторных исследований. Сделать такой анализ может каждый в любой больнице.

Что такое кровь? Она состоит из плазмы и форменных элементов. Последние - это тромбоциты, эритроциты и лейкоциты. В состав плазмы входят минеральные вещества, ионы, белки и другие компоненты.

Группа крови, резус-фактор: анализ

Существуют несколько основных показаний к проведению данной лабораторной процедуры:

беременность;
необходимость определения совместимости для переливания;
подготовка к операции;
несовместимость крови матери и ребенка, иными словами, гемолитическая болезнь новорожденного.

Обычно анализ делается в течение суток, после чего можно узнать результат. На бланке будут указаны два обозначения (группа крови и резус-фактор):

первая группа - О (I);
вторая - А (II);
третья - В (III);
четвертая - АВ (IV).

Резус-фактор имеет следующую аббревиатуру:

положительный - Rh+;
отрицательный - Rh-.

Различие групп крови

Как уже выяснили, существуют различия между понятиями "резус" и "группа крови". Анализ, сданный в обычной поликлинике, подтвердит вашу принадлежность к группе А, В, О или АВ. Они различаются между собой концентрацией биологических "антенн", которые запрограммированы в нашем организме на генном уровне. Это антигены. У каждой группы крови они свои. Также они имеют другое название - "агглютиногены". Они встречаются в крови в разных сочетаниях, часто их обозначают А и В. Сыворотка, наоборот, богата антителами, которые не могут переноситься собственными эритроцитами. Их обозначают буквами греческого алфавита - альфа и бета. К примеру, у людей с первой группой нет белковых молекул А и В. Зато в составе крови таких пациентов есть Н-антиген. Он также не имеет антител. У людей со второй группой эритроциты переносят антиген А, в сыворотке наблюдаются бетта-ангглютины. Эритроциты третьей группы переносят антиген В. В плазме, наоборот, много альфа-агглютинов. Резус-фактор 4 группы крови также влияет на концентрацию в ней индивидуальных молекул. Эритроциты переносят антигены А и В, зато естественных агглютинов у них нет.

Совместимость групп крови

Перед операцией обязательно устанавливается значение группы крови. Переливание (резус-фактор также влияет на совместимость) не может быть выполнено без этой обязательной процедуры. Реципиент и донор тщательно подбираются. Донорские антигены ни в коем случае не должны встретиться с агглютиногенами реципиента. Обычно это стандартная ситуация при переливании крови одной группы. Есть универсальные плазма и сыворотка. Речь идет о первой группе крови, которую можно смешивать с каждой из четырех.

Совместимость резус-факторов

При совместимости важна не только группа крови. Резус-фактор отрицательный и положительный также не должны конфликтовать. Еще в середине 20 века ученые доказали, что существуют люди с разной кровью. По результатам исследований было установлено, что большая часть населения (85%) имеют положительный резус, остальные 15% - отрицательный. Медики считают, что иметь Rh+ менее проблемно, чем Rh-. При переливании крови в этом случае будет намного меньше сложностей.

Положительный резус-фактор при беременности

Решение обзавестись семьей, а именно родить ребенка, - это очень ответственный шаг. Будущие мамы и папы должны со всей серьезностью подойти к этому вопросу, так как от их здоровья зависит состояние и иммунитет малыша. Перед тем как стать матерью, обязательно нужно узнать, какие у вас группа крови, резус-фактор. Беременность должна протекать спокойно, и возможные проблемы со здоровьем и риски не должны тревожить младенца и мать. Поэтому, перед тем как зачать ребенка, сдайте все анализы и узнайте, совместимы ли вы с вашим супругом по крови. Процедура сбора стандартная: у мужа и жены берут кровь из вены. После проведения всех лабораторных исследований доктор озвучит их результат. Самое важное для зачатия и появления здорового малыша - это совместимость по резус-фактору.

Если у мамы положительный Rh, то никаких проблем со здоровьем возникнуть не должно. Благополучное материнство обязательно сложится при резус-факторе Rh+ у обоих родителей. В большинстве случаев ребенок получает такую же кровь, как и у мамы, поэтому при таких условиях конфликт случается очень редко.

Отрицательный резус-фактор при беременности

Во время планирования ребенка не очень важна характеристика групп крови. Резус-фактор, напротив, - основной критерий, который оценивает врач-гинеколог. Будущие мамы с Rh- должны с большей серьезностью и осторожностью относиться к своей беременности. Резус-конфликты возникают именно тогда, когда у супруги отрицательный Rh, а у мужа - положительный. В таких ситуациях нужно на ранних сроках беременности вставать на учет в гинекологию и вовремя сдавать анализы. На этой стадии можно предотвратить возможные негативные последствия.

Несовместимость. Последствия

Иногда случается так, что супруги несовместимы, и тут ни при чем группа крови. Rh-фактор оказывает решающее влияние на будущее состояние матери и ребенка. Если у матери отрицательный резус, то возможно появление конфликта крови. Антитела, которые вырабатываются организмом беременной, будут стремиться уничтожить малыша, а именно антигены, которые переносят эритроциты ребенка. По статистике, в 50% случаев у новорожденного будет положительная кровь. Но во время родовой деятельности, когда отделяется плацента, некоторая часть крови младенца попадет к матери. И ее иммунная система будет вырабатывать антитела к положительному резусу. Так устроен организм. Опасными бывают повторные роды, когда в крови матери копятся антитела, которые впоследствии могут повредить плаценту ребенка и уничтожить его эритроциты.

Негативные последствия резус-конфликта:

гибель младенца в утробе;
выкидыш;
слабость;
малыш может родиться с признаками энцефалопии - поврежденной нервной системой.

Как избежать негативных последствий несовместимости?

К счастью, медицина не стоит на месте. И уже сегодня врачи научились предотвращать резус-конфликты. После первой беременности, после родов, матери вводят антитела, которые должны уничтожить положительные эритроциты ребенка, попавшие в организм. Чтобы иммунитет не запомнил эти клетки, необходима эта процедура. Тогда следующая беременность пройдет благополучно, и малыш родится здоровым и крепким.

По статистическим данным, всего у 3% женщин беременность сопровождается резус-конфликтом. Если обратиться к доктору на поздних сроках, есть вероятность того, что малыш будет развиваться с отклонениями. В первую очередь страдают органы зрения и слуха, речь и мозг. Гинекологи с особой внимательностью наблюдают за состоянием таких беременных. Во время вынашивания нужно постоянно сдавать анализы на антитела. В случае появления нежелательных результатов не надо паниковать и ждать скорых родов или выкидыша. Современная медицина намного продвинулась вперед и научилась бороться с такими последствиями. Не нужно читать отзывы и мнения других матерей, слушать рассказы бабушек и т. п. Доверяйте своему гинекологу и следуйте его указаниям.

Если резус-конфликт приобрел большие масштабы, то гинеколог может посоветовать женщине сделать аборт, то есть прервать беременность. В таких ситуациях родители сами принимают решение, опираясь на мнение доктора, и отвечают за последствия в случае сохранения ребенка.

Заболевания у людей с различными группами крови

У людей с различными группами крови есть расположенности к определенным видам болезней. Но вовсе не обязательно, что человек будет страдать от того или иного недуга. Австралийские ученые составили список заболеваний, которые могут возникнуть у людей с разными группами крови:

Кариес. Доказано, что он чаще всего встречается среди людей с третьей группой крови. Гены переносят так называемую предрасположенность к кариесу. Также проблемы с зубами и ротовой полостью наблюдаются у женщин с четвертой группой. Почти никогда не болеют кариесом люди с кровью А. Пациенты с 3 группой наиболее легко переносят этот недуг, и он более быстро поддается лечению.
Болезни желудка. У пациентов с первой группы крови риск страдать от язвы двенадцатиперстной кишки выше на 35%, чем у остальных. Гастрит с пониженной кислотностью - распространенный недуг у людей со второй группой крови. Также у них чаще встречаются хронический холецистит, камни в желчном пузыре и др. А что касается язвы, то она бывает у таких пациентов крайне редко. У носителей третьей группы крови часто встречаются опухоли толстой кишки.
Заболевания сердца. Гипертония - распространенное заболевание среди людей с первой группой крови. Приобретенный и врожденный митральный порок сердца, ишемия, склонность к ревматизму, который чаще всего и вызывает эти недуги, бывает у пациентов со второй группой. У людей с третьей группой чаще развивается инфаркт Миокарда, четвертой - тромбофлебит, тромбоз, атеросклероз, облитерирующий эндартериит.
Проблемы с щитовидной железой чаще всего есть у пациентов со 2 и 3 группами крови.
Онкологические заболевания. Носители первой группы крови, в отличие от третьей, редко страдают от опухолей толстого кишечника, у людей со второй группой чаще встречаются острой лейкоз и рак желудка.
Психические болезни. Шизофренией обычно страдают люди с первой группой. Психозы и неврозы чаще наблюдаются у носителей третьей и четвертой групп крови.
Инфекционные болезни. Гриппом А чаще страдают пациенты с первой группой крови.

Совместимость групп крови и резусов - очень важная вещь. Не стоит пренебрегать советами медиков-специалистов, особенно во время беременности.

syl.ru

Определение групп крови, резус- фактор

В средние века делались неоднократные попытки переливания крови от животных человеку и от человека человеку. Однако практически все они заканчивались трагически. Первое удачное переливание человеческой крови пострадавшему произвел 1667 году врач Дени. Причины тяжелых осложнений, возникающих при гемотрансфузиях, первым установил в 1901 году Карл Ландштейнер. Он смешивал капли крови различных людей и обнаружил, что в ряде случаев происходит склеивание эритроцитов - агглютинация и их последующий гемолиз. На основании своих опытов Ландштейнер сделал вывод, что в эритроцитах имеются белки-агглютиногены, способствующие их склеиванию. Он выявил 2 агглютиногена А и В. На основании их отсутствия или наличия в эритроцитах разделил кровь на I, II и III группы. В 1903 г. его ученик Адриано Штурли обнаружил IV группу крови. Позже в плазме крови были обнаружены белки, которые взаимодействуют с агглютиногенами и вызывают склеивание эритроцитов. Их назвали агглютининами a и b. Сейчас установлено, что антигенными свойствами обладает мембранный гликопротеид эритроцитов - гликофорин. Агглютинины являются иммуноглобулинами M и G, т.е. g-глобулины. Агглютиноген А и агглютинин a, а также агглютиноген В и агглютинин b называют одноименными. При их взаимодействии происходит склеивание эритроцитов. Поэтому в крови человека находятся только разноименные агглютиногены и агглютинины. В крови новорожденных агглютининов нет. Однако затем компоненты пищи, вещества вырабатываемые микрофлорой кишечника, способствуют синтезу тех агглютининов, которых нет в эритроцитах данного человека.

Группы крови системы АВО обозначаются римскими цифрами и дублирующим названием антигена:

I(0) - в эритроцитах нет агглютиногенов, но в плазме содержатся агглютинины a и b.

II(A) - агглютиногены А и агглютинины b.

III(B) - агглютиногены В и агглютинины a.

IV(AB) - в эритроцитах агглютиногены А и В, агглютининов в плазме нет.

В настоящее время обнаружено, что в эритроцитах I группы имеется слабый H-антиген. Агглютиногены А делятся на подтипы А1 и А2. Первый подтип встречается у 80% людей и обладает более выраженными антигенными свойствами. Реакций при переливании между кровью этих подгрупп не происходит.

Наследование группы крови осуществляется за счет генов А, В и О. В хромосомах человека содержится 2 из них. Гены А и В являются доминантными. Поэтому у родителей со II и III группой крови ребенок может иметь любую из 4-х групп.

1. ОО

2.АО

3.ОА + ОВ = ВО

4. АВ

В 1940 году К. Ландштейнер и И. Винер обнаружили в эритроцитах еще один агглютиноген. Впервые он был найден в крови макак-резусов. Поэтому был назван ими резус-фактором.

В настоящее время допускается переливание только одногрупповой крови по системе АВО. Для определения групповой принадлежности, каплю исследуемой крови смешивают на предметном стекле с каплей стандартных сывороток I, II и III групп. Таким методом определяются антигенные свойства эритроцитов. Если ни в одной из сывороток не произошла агглютинация, следовательно в эритроцитах агглютиногенов нет. Это кровь I группы. Когда агглютинация наблюдается с сыворотками I и III групп, значит эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген А. Т.е. это кровь II группы. Агглютинация эритроцитов с сыворотками I и II групп говорит о том, что в них имеется агглютиноген В и эта кровь III группы. Если во всех сыворотках наблюдается агглютинация, значит эритроциты содержат оба антигена А и В. Т.е. кровь IV группы. Желательно проводить исследование и с сывороткой IV группы. Более точно группу крови можно определить с помощью стандартных эритроцитов I, II, III и IV групп. Для этого их смешивают с сывороткой исследуемой крови и определяют содержание в ней агглютининов. Резус принадлежность крови определяют путем ее смешивания с сывороткой, содержащей резус-агглютинины.

Кроме этого, чтобы избежать ошибки при определении группы крови и

наличия D-антигена, применяют прямую пробу. Она необходима и для выявления несовместимости крови по другим антигенным признакам. Прямую пробу производят путем смешивания эритроцитов донора с сывороткой реципиента при 370 С. При отрицательных результатах первые порции крови переливаются дробно.

Билет №25.

studopedia.ru

Группа крови и резус-фактор

Общеизвестно, что выявлено 4 группы крови. Принадлежность крови каждого человека к той или иной из них − явление врожденное и постоянное. Самой распространенной системой групп крови является АВ0 (а, б, ноль). Состав крови довольно сложный, но для определения группы крови важны эритроциты, на мембране которых могут присутствовать сигнальные молекулы − антигены. Основными являются антигены А и В. Резус-фактор (Rh) − это антиген (липопротеид, белок) который также может находиться на оболочке клеток эритроцитов. Он состоит из более чем 50 антигенов, основными из которых являются С, с, D, d, Е, е, В. Поскольку о резусе важно знать, положительный он или отрицательный, говорят об антигенах D и d и их сочетаниях при наследовании белка детьми от родителей.

Определение группы крови и резус-фактора

Для того чтобы выявить группу крови человека, выясняют, есть ли в ней антигены А и В:

Если их нет вовсе − это значит, что кровь относится к I группе, которая обозначается “0”.
Если присутствует антиген А − эта кровь относится ко II группе, обозначается “А”.
Если на мембране клеток присутствует антиген В − эта кровь относится к III группе и обозначается “В”.
Если же антигены А и В присутствуют − то кровь IV группы, обозначается “АВ”.

Чтобы узнать, каков резус-фактор, нужно выяснить следующее:

Если данный белок есть − считается, что резус-фактор человека положительный.
Если белка не обнаружено – резус-фактор отрицательный.

По данным исследований известно, что примерно у 85% жителей планеты положительный Rh.

Как узнать резус-фактор и группу крови?

Бывает так, что в течение жизни знание группы крови и резус-фактора не пригождается. Однако есть ситуации, при которых узнать данные сведения бывает необходимо:

перед проведением операции;
перед переливанием крови;
перед трансплантацией органов;
иногда перед планированием беременности;
при наблюдении и контроля беременных женщин;
для определения гемолитической болезни новорожденных младенцев.

Для этого нужно сделать анализ на резус-фактор и группу крови.

Определение группы, к которой относится кровь, состоит в том, чтобы исследовать ее по системе АВ0. Для выяснения группы крови необходимо узнать, содержатся ли в эритроцитах антигены А и В. Исследование проводят с использованием контрольных сывороток крови, в которых есть антитела к антигенам А и В. Антитела к антигену А называются анти-А и обозначаются α (альфа), а к В – анти-В и обозначаются β (бета). При проведении определенных манипуляций происходит реакция склеивания эритроцитов, называемая агглютинацией. Антигены А и В называют агглитиногенами, а антитела α и β − агглютининами.

Если агглютинация (склеивание) имеет место, то резус положительный, если же нет – отрицательный.

Для выяснения того, какова группа крови, сравнивают специфические антитела (α и β) и антигены (А и В), иначе говоря, 4 группы крови получаются в результате различных сочетаний агглитининов и агглитиногенов.

Исследовать Rh крови можно несколькими способами:

Экспресс метод. Это основной способ исследования – когда пробирку с образцами крови не подогревают. Для этого нужна универсальная сыворотка, подходящая ко всем группам крови.
Желатиновый способ. Смешивают в равных пропорциях кровь и 10%-ный раствор желатина.
Альтернативные методы. Исследование с помощью чашек Петри.
При помощи папаина. Такое определение проводится в крайних случаях для выявления совместимости перед процедурой переливания крови.

Особенности людей с различными группами крови

Люди, у которых первая группа крови резус положительный, решительны и уверены в себе.

Те, у кого группа крови вторая, а резус положительный, в общении коммуникабельны, открыты, доброжелательны, умеют приспосабливаться.

Люди с третьей группой крови и резусом положительным оптимистичны и открыты, любят приключения.

С четвертой группой крови и тем же резусом люди имеют кроткий и мягкий характер, они умны и неординарны.

WomanAdvice.ru

9. Участие в определении группы крови и резус-фактора.

Определение группы крови по системе АВ0 (стандартная методика).

1. Исследование проводится при помощи двух серий стандартных гемагглютинирующих сывороток (I сыворотка – этикетка бесцветная, II – синяя, III – красная, IV – ярко-желтая) на подписанной (фамилия больного) фарфоровой пластинке или тарелке.

2. Соотношение объема исследованной крови и сыворотки должно быть 1:10.

3. Исследование можно производить при температуре воздуха от 15 до 25 0С.

4. Пластинку осторожно покачивают. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, в капли добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия. Результат читают через 5 мин:

1) I группа крови - агглютинации нет ни в одной капле;

2) II группа - стандартные сыворотки I и III групп агглютинируют эритроциты, а с сывороткой II группы агглютинация не наступает;

3) III группа - стандартные сыворотки I и II групп дают положительную реакцию, а сыворотка III группы - отрицательную;

4) IV группа - стандартные сыворотки всех трех групп вызывают агглютинацию. Однако для окончательного заключения необходимо провести контрольное исследование на специфичность реакции со стандартной гемагглютинирующей сывороткой IV группы.

Определение группы крови по системе АВО (экспресс-методика).

1. Исследование проводят двумя моноклональными сыворотками: анти-А (розового цвета) и анти-В (бирюзового цвета).

2. Реакция проводится на фарфоровой пластинке при обычном температурном режиме.

3. Наблюдают при покачивании в течение 3 мин.

Результат читается следующим образом:

1) с сывороткой анти-А агглютинации нет, а с анти-В есть - исследуемая кровь В (III);

2) в капле с сывороткой анти-А наступила агглютинация, с анти-В нет - исследуемая кровь А (II);

3) агглютинация наступила с обеими сыворотками - исследуемая кровь АВ (IV);

4) агглютинация не наступила в обеих каплях - кровь 0 (I);

Определение Rh-фактора крови - в настоящее время проводится с использованием универсального реагента антирезус.

1. На дно пробирки помещают 1 каплю исследуемой крови и 1 каплю стандартного реагента и встряхивают.

2. Кладут пробирку на горизонтальную поверхность и «катают» ладонью не менее 3 мин, чтобы содержимое растекалось по стенкам

3. Добавляют 2-3 мл физраствора, закрывают пробирку пробкой и 2-3 раза спокойно переворачивают.

Оценка результата: на фоне света, если видны крупные хлопья – произошла агглютинация (резус-положительная кровь), если в пробирке равномерная розовая жидкость без хлопьев – агглютинации нет (резус-отрицательная кровь)

Запись в историю болезни результата исследования:

1. Определение группы крови проводится двумя независимыми врачами (одно исследование – на отделении, второе – в кабинете трансфузионной терапии)

2. Если результат совпадает, он вписывается в титульный лист истории болезни ОБЯЗАТЕЛЬНО ВСЕ СЛОВАМИ (пример: резус-положительная, НО НЕ Rh+), ставится подпись врача и дата исследования.

10.Пункции вен, артерий, венесекция.

Внутриаортальная и внутриартериальная трансфузия.

Показания: 1) остановка сердца при клинической смерти, вызванная массивной невосполненной кровопотерей 2) терминальное состояние, связанное с длительной гипотензией (АД 60 мм рт.ст. и ниже). Преимущество данного метода состоит в непосредственном снабжении кровью коронарных сосудов и сосудов головного мозга, рефлекторной стимуляции сердечной деятельности. Этот метод позволяет в сжатые сроки перелить достаточное количество крови; 3) длительное введение растворов лекарственных средств в аорту или ее ветви (селективно) с целью создания максимальной их концентрации в очаге поражения при онкологических заболеваниях, гнойно-деструктивных поражениях органов брюшной и грудной полостей, конечностей, при разлитом перитоните, деструктивном панкреатите, с целью тромболизиса при тромбозах, тромбоэмболиях и облитерующих заболеваниях артерий.

При внутриартериальном введении проникновение лекарства в ткани ввиду высокой концентрации его в крови бывает более быстрым. По сравнению с внутривенным путем введения при внутриартериальном минуются тканевые фильтры: легкие, печень, почки, в которых происходят задержка, разрушение и выведение лекарственных веществ. Это важно, т.к. чем быстрее вещество переходит из крови в ткани, тем меньше оно связывается с белками плазмы; 4) внезапное массивное кровотечение во время торакальных операций; 5) электротравма; 6) асфиксия различной этиологии; 7) интоксикация различного происхождения. Техника

В экстренных случаях внутриартериальное нагнетение проводят шприцем после чрескожной пункции или катетеризации по Сельдингеру. Когда это не удается, периферическую артерию обнажают послойным разрезом и производят пункцию или артериотомию. При необходимости внутриартериальное переливание может быть проведено в магистральные сосуды полостей, а при травмах и отрывах конечностей можно использовать зияющий конец сосуда.

Чем дистальнее от сердца вводится кровь, тем менее выражено ее стимулирующее действие. При использовании для трансфузий крупных артерий (плечевая, бедренная, сонная) эффект более выражен из-за лучшего и быстрого кровоснабжения сердца и головного мозга. Опасность возникновения спазма крупных сосудов, тромбоза из-за повреждения эндотелия с развитием нарушения кровоснабжения конечности вынуждают использовать периферические артерии (лучевую и заднюю большеберцовую), которые легко доступны для выделения и после внутриартериальной трансфузии могут быть перевязаны без боязни развития ишемии тканей ввиду наличия выраженных коллатеральных путей. При помощи баллона Ричардсона и манометра в ампуле с кровью или флаконе создается высокое давление (160-200 мм рт.ст.). Давление ниже указанного уровня может оказаться неэффективным, а более высокое давление может вызвать кровоизлияние в различные органы и особенно в спинной мозг вследствие разрыва мелких сосудов. С целью поддержания определенного постоянного давления во флаконе с кровью или кровезаменителями, предупреждения воздушной эмболии в момент завершения переливания можно использовать систему В.П.Сухорукова, включающую еще воздушный компенсатор (банка от аппарата Боброва или сосуд большей емкости) и стеклянную камеру с плавающим стеклянным поплавком, перекрывающим систему. Рефлекторная стимуляция тонуса сосудов усиливается при внутриартериальной инфузии под меняющимся давлением пульсирующей струей: сильное ритмичное растяжение артериальных стенок оказывает более мощное воздействие на нервно-рецепторный аппарат сосудистой стенки и является более физиологичным. Для создания пульсирующего тока крови трубку системы пережимают пальцем или зажимом 60-80 раз в минуту. Эффект от внутриартериальной трансфузии наблюдается при вливании со скоростью 200-250 мл за 1,5-2 мин. под постоянным давлением и в течение 20-30 мин. при дробном переливании. Для достижения эффекта при шоке бывает достаточно ввести в артерию 100-250 мл крови, при клинической смерти и длительной артериальной гипотензии до 1000 мл. Продолжительность дробного переливания различна: от нескольких минут до нескольких часов - при затянувшейся гипотонии или развитии торпидного шока. После восстановления сердечной деятельности давление следует снизить 120-140 мм рт.ст. При усилении сердечной деятельности нужно начать переливание крови и кровезаменителей в вену, продолжая внутриартериальное нагнетание до отчетливого улучшения деятельности сердца. Обычно внутриартериальное вливание проводится в порядке чрезвычайной срочности. Поэтому врач должен уметь быстро обнажить и отпрепаровать артерию. Правильный рациональный доступ иногда может решить судьбу операции и спасти жизнь пострадавшего. Поскольку при терминальных состояниях пульсация периферических артерий не определяется, метод чрескожной пункции и катетеризации артерии вызывает затруднения. Приходится одну из артерий обнажить оперативным путем, а затем провести ее катетеризацию по методу Сельдингера. При пункции артерия травмируется меньше, чем при артериотомии, отпадает надобность наложения сосудистого шва после извлечения катетера, в месте введения катетера обеспечивается полная герметизация без прекращения кровотока и дистальном отделе сосуда в период наложения сосудистых зажимов.

Внутриаортальная трансфузия

Через катетер, введенный в брюшной или грудной отдел аорты, можно переливать кровь или ее компоненты под давлением 180-200 мм рт.ст. За 1-2 минуты через катетер с внутренним диаметром 3-4 мм можно возместить кровопотерю до 1000 мл, хотя для восстановления деятельности сердца достаточно ввести 250-500 мл. Переливание крови в аорту осуществимо двумя способами: 1. Во время полостных операций, осложнившихся массивной кровопотерей и геморрагическим шоком, длинной иглой на 20-граммовом шприце под острым углом пунктируют грудную (при торакальных операциях) или брюшную (при абдоминальных операциях) отделы аорты. Целесообразно дистальнее места пункции аорту пережимать. Кровь и ее компоненты вводят по направлению к сердцу с помощью системы для внутриартериального переливания или шприцем. После завершения пункции место прокола прижимают до остановки кровотечения. 2. Чаще для катетеризации аорты используют бедренную и плечевую артерии. Катетеризация аорты через бедренную артерию может осуществляться путем: а) введения катетера ретроградно через второстепенную боковую ветвь; б) введения катетера в сосуд после его обнажения через прокол или разрез его стенки; в) чрескожной катетеризации по Сельдингеру. Для продолжительной инфузии катетеризация аорты осуществляется через бедренную артерию с преимущественным использованием поверхностной надчревной артерии. Это диктуется следующими соображениями: 1) при зондировании магистрального сосуда надо обеспечить минимальное травмирование его интимы во избежание внутриартериального тромбоза; 2) при нахождении катетера в крупной артерии трудно предупредить образование гематомы в зоне его введения и возможные инфекционные осложнения; 3) по окончании инфузии необходимо предотвратить кровотечение из артерии. Детям до 13-14 лет катетеризацию через боковые ветви проводить нельзя из-за слишком малого диаметра ветвей. Внутриартериальные трансфузии при клинической смерти эффективнее, если конец катетера достигает дуги или восходящей части аорты. Чтобы создать достаточную концентрацию лекарственных веществ во всех органах брюшной полости, катетер должен быть введен до уровня диафрагмы. Это можно определить рентгенографией в палате: ориентиром правильного его расположения служат позвонки и тень диафрагмы. Метод ретроградной катетеризации аорты через обнаженные периферические артерии имеет серьезные недостатки: а) операция продолжительна по времени (4-5 мин), когда быстрота введения крови в аорту играет решающее значение для судьбы больного; б) кровотечение и тромбоз в области пункции и катетеризации. Техника обнажения и катетеризации артерий. Лучевую артерию в нижней трети предплечья наиболее удобна обнажать при срочных оперативных вмешательствах, т.к. она располагается поверхностно. Проекционная линия проводится в положении супинации предплечья от медиального края сухожилия двуглавой мышцы плеча (или середины локтевой ямки) до пульсовой точки артерии (шиловидного отростка лучевой кости). Разрез кожи, подкожной клетчатки, поверхностной фасции длиною 5-6 см по проекции артерии. Крючками расширяют рану, по желобоватому зонду вскрывают собственную фасцию и обнажают лучевую артерию с сопровождающими венами, расположенными в лучевой борозде между сухожилиями m.brachioradialis снаружи и m.flexor carpi radialis изнутри. Если артерия достаточного диаметра, целесообразнее ее пунктировать. После введения иглы в просвет артерии, прежде чем начать нагнетание крови, следует прижать артерию дистальнее места прокола, чтобы нагнетаемая кровь поступала только по направлению к сердцу. Если диаметр артерии невелик, после гидравлической препаровки 1-2% раствором новокаина и выделения ее берут на две лигатуры и между ними ножницами подсекают переднюю стенку, вводят в центральном направлении катетер и закрепляют его на артерии лигатурой. После удаления катетера, место его введения прижимается марлевым тампоном на 3-5 минут. При большом дефекте следует наложить на рану стенки артерии шов атравматической иглой. В случае неудачи лучевую артерию перевязывают. Рану послойно ушивают, закрывая повязкой. Для обнажения задней большеберцовой артерии проводят дугообразный разрез кожи, подкожной клетчатки и поверхностной фасции длиною 5-6 см позади медиальной лодыжки на середине расстояния между нею и ахилловым сухожилием. После рассечения по желобоватому зонду плотных блестящих волокон retinaculum mm. flexorum находят заднюю большеберцовую артерию с двумя сопровождающими венами. Кзади от них располагается большеберцовый нерв. В фасциальный футляр вводят 1-2% раствор новокаина. Артерию выделяют, пунктируют между двумя лигатурами или надсекают ее переднюю стенку, вслед за чем в просвет артерии вводят иглу или катетер. Обнажение плечевой артерии в нижней трети плеча: рука отводится и находится в положении супинации. Проекционная линия плечевой артерии проводится от вершины подмышечной впадины до середины расстояния между внутренним надмыщелком плечевой кости и сухожилием двуглавой мыщцы плеча. Она соответствует внутренней борозде, образованной краями двуглавой и плечевой мышцами, а также внутренней головкой трехглавой мышцы плеча. Прямой доступ: разрезом по проекционной линии длиною 5-6 см рассекают кожу и подкожную клетчатку, затем по желобоватому зонду разрезают собственную фасцию плеча. Артерию сопровождают две вены и срединный нерв, расположенный кнутри от артерии. Их разделяют посредством гидравлической препаровки 1-2% раствором новокаина. Окольный доступ осуществляется по выпуклости брюшка двуглавой мышцы на 2 см кнаружи от проекционной линии с целью предупреждения ранения плечевой артерии с венами, срединного нерва и вовлечения его в рубцовый процесс. Разрез длиной 7-8 см проводится через кожу, подкожную клетчатку, поверхностную и собственную фасцию, являющуюся передней стенкой фасциального футляра двуглавой мышцы. Мышцу крючками отводят кнаружи. Задняя стенка фасциального ложа двуглавой мышцы служит передней стенкой футляра сосудистонервного пучка. Ее осторожно разрезают по желобоватому зонду и выделяют плечевую артерию. Обнажение бедренной артерии проводится в скарповском треугольнике. Проекционная линия ее начинается на 2 см кнутри от границы между средней и внутренней третями паховой связки и проводится к внутреннему мыщелку бедра. Нога должна быть слегка согнута в коленном и тазобедренном суставах и ротирована кнаружи. Для введения крови артерию Следует выделять дистальнее уровня отхождения глубокой артерии бедра. Разрезом длиною около 10 см на 4-5 см ниже пупартовой связки по проекционной линии рассекают кожу, подкожно-жировую клетчатку, поверхностную фасцию, широкую фасцию бедра. Бедренная артерия залегает кнаружи от вены. Их разделяют с помощью 1-2% раствора новокаина. Для обнажения общей сонной артерии больного укладывают на спину с валиком под плечами, голова его повернута в противоположную сторону. Удобнее подходить к артерии в пределах сонного треугольника. Разрез проводят по переднему краю грудино-ключично-сосцевидной мышцы от уровня верхнего края щитовидного хряща вниз длиною 4-6 см. Рассекают кожу, подкожную клетчатку, поверхностную фасцию с подкожной мышцей, собственную фасцию. Тупым крючком смещают грудино-ключично-сосцевидную мышцу кнаружи и обнажают фасциальный футляр сосудисто-нервного пучка, содержащего общую сонную артерию, внутреннюю яремную вену и блуждающий нерв. Следует избегать повреждения находящейся поверх футляра шейной петли, иннервирующей передние шейные мышцы. С помощью 1-2% раствора новокаина, введенного через тонкую иглу в фасциальный футляр, посредством гидравлической препаровки разобщают элементы пучка. После этого выделяют общую сонную артерию, оставляя внутреннюю яремную вену снаружи, а блуждающий нерв - сзади. Артерию приподнимают обведенной вокруг нее полоской марли, вводят в артерию катетер, соединенный с системой для трансфузии. Переливание производят под давлением в 200-250 мм рт.ст. С целью катетеризации аорты общую сонную артерию выделяют на протяжении 3-4 см, подводят под нее два резиновых турникета. Измеряют расстояние от места выделения артерии до уровня соединения рукоятки грудины и ее телом. Турникеты затягивают, стенку артерии между ними рассекают поперечно и через разрез в каудальном направлении вводят до сделанной на нем метки катетер, достигающий восходящего отдела аорты. Соединяют катетер с системой для внутриартериального нагнетания. После окончания трансфузии катетер извлекают, накладывают шов на рану стенки артерии, В нижней трети общую сонную артерию обнажают по заднему краю грудино-ключично-сосцевидной мышцы. В настоящее время длительную катетеризацию магистральных артерий предпочитают производить, используя для этой цели боковые ветви артерий в наиболее доступных зонах, что позволяет снизить риск осложнений (спазм, тромбоз, отслоение интимы, кровотечение). Для катетеризации общей сонной артерии наиболее часто используют a.temporalis superficialis, для плечевой - a.thoracoacromialis, для бедренной a.epigastrica inferior, a.circumflexa ilium superficialis. При лечении тромбооблитеррирующих заболеваний артерий и гнойно-некротических процессов в области конечностей (остеомиелит и др.) для внутриартериального введения лекарственных веществ наиболее часто проводят катетеризацию а.а. epigastrica inferior, circumflexa ilium superficialis. Для обнажения нижней надчревной артерии вертикальным разрезом длиной 4-5 см на середине расстояния между пупком и лонным сочлением рассекают влагалище прямой мышцы живота по ее наружному краю, мышцу отодвигают кнутри. В предбрюшной клетчатке отыскивают, выделяют и берут на держалки нижнюю надчревную артерию. Периферический конец ее перевязывают, а в проксимальный после вскрытия просвета проводят катетер 2 мм на глубину 8-9 см, фиксируя его двумя кетгутовыми лигатурами, а конец через дополнительный прокол выводят наружу и фиксируют к коже. Обнажение a. circumflexa ilium super ficialis производят разрезом длиной 4-6 см на 1 см выше пупартовой связки и параллельно ей. Артерию выделяют на протяжении 2-3 см до бедренной артерии. Дистальный конец ее перевязывают, а в проксимальный после рассечения стенки сосуда вводят катетер до устья. Его фиксируют двумя лигатурами, конец выводят через дополнительный прокол наружу и укрепляют 2-3 швами на коже бедра - он не должен препятствовать движениям в тазобедренном суставе. В палате катетер соединяют с системой, через которую капельно подается инфузионная среда. Поднятие бутыли на высоту 2-3 метра на штанге обеспечивает поступление раствора со скоростью 18-20 капель в мин. При отключении системы следует заполнить катетер раствором гепарина и перекрыть его просвет. После окончания инфузии катетер удаляют из артерии, прижимают место прокола на 10-15 мин. или затягивают ранее наложенную провизорную лигатуру. Осложнения пункции и катетеризации артерий 1) Спазм артерии: нагнетание крови и кровезаменителей в периферические артерии под давлением свыше 200 мм рт.ст. угрожает развитием длительного спазма. Он сопровождается бледностью кожи, слабостью мышц, скованностью движений пальцев, потерей чувствительности и понижением температуры конечности. Имеются примеры омертвения тканей из-за длительного спазма артерий, потребовавшего проведения ампутации конечности. Для профилактики спазма следует использовать введение раствора новокаина в фасциальный футляр сосудисто-нервного пучка (периартериальная новокаиновая блокада) и 5-10 мл 0,25% раствора новокаина в просвет артерии, бережно обращаться с элементами сосудисто-нервного пучка при выделении артерии, не допускать введения в артерию охлажденной крови или трансфузионных сред. 2) Аррозивное кровотечение, гематома и возникновение ложных аневризм: с целью их профилактики следует в момент извлечения иглы прижать артерию в зоне пункции на 5 мин. Иногда приходится обнажать артерию и накладывать пристеночные швы. После диагностических и лечебных процедур (ангиография, пункция и катетеризация магистральных сосудов) не исключена возможность появления ложных аневризм. 3) Тромбоз и обтурация просвета с угрозой гангрены конечности: подобное осложнение пункции лучевой артерии не угрожает жизнеспособности кисти. Перед пункцией необходимо провести пробу на адекватность коллатерального кровообращения: по проекции сосуда пережимают пальцами лучевую артерию и просят больного несколько раз сжать и разжать пальцы - при достаточном коллатериальном кровообращении бледный оттенок кожи ладони сменяется нормальным цветом через 10 секунд. Тромбозы бедренной артерии в зоне нахождения катетера и образование тромба в просвете самого катетера с эмболизацией артерии на ее протяжении являются не менее грозными осложнениями, чем кровотечения. Для профилактики тромбоза следует применять при переливании крови капроновые сетчатые фильтры, задерживающие микросгустки, а также проводить антикоагулянтную терапию. Травма стенки крупных сосудов может сопровождаться их тромбозом выраженной ишемией тканей и угрозой омертвения, что потребует дополнительного оперативного вмешательства (тромбэктомия и даже ампутация). 4) Воздушная эмболия возникает чаще при мониторном контроле артериального давления прямым методом. Пузырьки воздуха могут распространяться иногда ретроградно по лучевой артерии из шприца, с помощью которого промывают артериальные катетеры. Кроме того, она может явиться следствием невнимательности врача, когда нет достаточного контроля за герметичностью системы для внутриартериального переливания при ее монтаже, за столбом трансфузионной среды во флаконе, при запоздалом прекращении трансфузии. Нагнетание крови и растворов в артерию производят под большим давлением, что также способствует возникновению воздушной эмболии. 5) Невриты с клинической картиной пареза или паралича возникают при грубом выделении артерии и травме соседних нервов, при паравазальном введении крови и сдавлении их образовавшимися рубцами.

Венепункция

Показания: применяется для проведения кратковременной инфузионной терапии и эпизодического введения лекарственных средств, парентерального питания; взятия венозной крови для исследований; обеспечения условий для последующей катетеризации вены. Техника. Удобнее всего пунктировать срединную вену в области локтевого сгиба, т.к. она лежит поверхностно, не сопровождается и не пересекается нервами. При необходимости можно использовать поверхностные вены предплечья, кисти или вены нижних конечностей (скрытую вену впереди медиальной лодыжки), вены стопы. Проксимальнее места венепункции на конечность накладывают жгут или манжетку от аппарата для измерения АД, которые должны задержать ток крови только в венах. Для усиления венозного застоя (благодаря чему вены становятся более рельефными) предлагают несколько раз сжать и разжать пальцы, а также можно применять массаж или поколачивание. Надев иглу на шприц, проверяют ее проходимость. Для фиксации вены кожу натягивают левой рукой, а правой по направлению к центру (по току крови) прокалывают иглой кожу сбоку от вены, а затем и стенку вены, во избежание прокола ее обеих стенок. После прокола вены за потягиванием поршня в шприце появляется кровь. Иглу продвигают на 1-2 см по ходу сосуда. При введении лекарственных веществ в венозное русло жгут тотчас снимают. Если венепункция сделана с целью взятия крови, жгут оставляют затянутым до конца манипуляции. Пункцию вены можно осуществлять иглой, надетой на шприц, или иглой без шприца. При венепункции со шприцем, где находится лекарственное вещество, кровь в результате давления самостоятельно поступает в шприц. После вливания иглу извлекают, придавливая место укола марлевым шариком, смоченным спиртом, для предупреждения появления гематомы. Руку на 3-5 минут сгибают в локтевом суставе. При венепункции без шприца к игле присоединяют систему для введения внутривенно крови и лекарственных веществ. Проксимальный отдел иглы фиксируют к коже лейкопластырем. Катетеризация имеет преимущество перед пункцией, т.к. позволяет вводить растворы в одну вену в течение нескольких суток. Катетеризацию периферической вены производят с помощью специальной полиэтиленовой канюли, надетой на иглу, которая служит стилетом, либо путем пункции иглой с широким просветом, через которую вводят катетер, а иглу удаляют. Катетер фиксируют липким пластырем. Противопоказания: воспалительный процесс вены (флебит, тромбофлебит), тромбоз ее, мигрирующий тромбофлебит. Осложнения: прокалывание вены насквозь или выхождение иглы из вены, в результате чего лекарственное вещество попадает в окружающие ткани (больной жалуется на боль в области пункции, отмечается припухлость, синюшность). В этих случаях необходимо извлечь иглу, или, если удастся, слегка продвинуть ее по ходу вены. При возникновении осложнений (флебит, тромбофлебит), а также после завершения использования катетера, его удаляют.

Венесекция

Показания: применяется при плохой выраженности подкожных вен в силу анатомических (большой слой подкожной клетчатки, слабая развитость венозных стволов - рассыпной тип) или функциональных (шок, гиповолемия) причин, а также для проведения длительной инфузионной терапии. Преимуществом венесекции является визуальный контроль введения катетера в вену и его надежная фиксация. Техника Вену обнажают разрезом кожи и клетчатки длиной 2-3 см, проходящим поперечно, косо или параллельно проекции сосуда. Анатомическим пинцетом тупым путем осторожно выделяют вену на протяжении 1,5-2 см и подводят под нее 2 шелковые лигатуры. Дистальную лигатуру завязывают и натягивают для фиксации вены. Стенку вены проксимальнее лигатуры или пунктируют толстой иглой, или ножницами надрезают стенку вены на 1/2-1/4 ее диаметра и в просвет ее вводят канюлю, иглу или катетер, над которым и затягивают вторую лигатуру, присоединяют систему для переливания. Края кожной раны сближают шелковыми швами, одним из которых дополнительно фиксируют катетер или иглу. Если катетер не удается ввести из-за малого диаметра вены, отверстие ее осторожно расширяют браншами зажима типа «москит». После введения катетера укрепляют его второй лигатурой и тем самым создают герметичность между веной и катетером. Катетер может находиться в вене несколько дней. После окончания внутривенного вливания систему отсоединяют от катетера. Катетер промывают шприцем, вводя в него раствор гепарина (1000 ЕД на 10 мл изотонического раствора натрия хлорида), после чего в наружный конец его вставляют специальную канюлю или иглу с канюлей, фиксируя их бинтованием или лейкопластырем. Раствор гепарина в катетере препятствует образованию тромба и позволяет использовать катетер для многократных вливаний. Учитывая, что действие гепарина продолжается лишь в пределах 3-4 ч, катетер необходимо снова промыть гепарином или произвести внутривенное вливание. После удаления иглы или катетера из вены на рану накладывают асептическую давящую повязку на 6-12 часов. Перевязка вены дистальнее места введения катетера практически ведет к выпадению функции этого участка вены. Осложнения: полное пересечение вены, тромбоз, флебит или тромбофлебит, инфицирование раны, случайное ранение артерии и даже ошибочная катетеризация плечевой артерии вместо головной вены, повреждения нервных стволов, перемещение плохо фиксированного катетера в сосудистое русло.

StudFiles.ru

Определение резус-фактора

Определение резус-фактора методом конглютинации

Существует несколько методов определения Rh-фактора. Наиболее распространен метод конглютинации на чашках Петри. Для этого исследования, кроме глазных пипеток и флакона с изотоническим раствором хлорида натрия, необходимо иметь чашки Петри, водяную баню с постоянной температурой 46—48оС и стандартные ан-тирезусные сыворотки всех групп системы АВО. Для анализа берут антирезусную сыворотку двух серий, одногруппную по системе АВО с исследуемыми эритроцитами. В чашку Петри наносят по 2 капли антирезусной сыворотки, слева — одной серии, справа — другой в 3 ряда для 3 исследований. В каждую серию прибавляют по капле эритроцитов (исследуемые, контрольные Rh-положительные и контрольные Rh-отрицательные). После перемешивания чашку Петри помещают в водяную баню на 10 минут, после чего рассматривают в проходящем свете.

Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате, отсутствие ее - об отрицательном. Для контроля в этом методе используют заведомо Rh-отрицательные и Rh-положительные эритроциты.

Определение резус-фактора экспресс-методом

В последнее время для определения резус-принадлежности применяют экспресс-метод. Реакцию проводят в пробирках без подогрева. Для этого необходима специальная, универсальная для всех групп крови системы АВО сыворотка, приготовленная особым способом на полиглюкине.

В пробирку помещают 1 каплю сыворотки, добавляют 1 каплю исследуемых эритроцитов и после 3-минутного покачивания заливают 3-5 мл изотонического раствора хлорида натрия, трижды переворачивают пробирку и определяют результат в отраженном свете. Наличие агглютинации свидетельствует о наличии Rh-антигена.

Определение резус-фактора желатиновым экспресс-методом

Широко применяется также желатиновый экспресс-метод, основанный на добавлении к крови 1 капли 10 % раствора желатина и 10-минутной инкубации пробирок при +37°С и добавлении теплого изотонического раствора хлорида натрия; производят перемешивание содержимого пробирки. Желатин способствует исчезновению неспецифической агглютинации.

На этом же принципе основан метод определения Rh с папаином.

Любой из этих методов может быть использован в экстренных случаях. Независимо от результатов проведенных исследований и имеющихся данных об идентичности групп крови донора и реципиента перед переливанием крови необходимо провести пробы на индивидуальную совместимость.

Аннотация

1. Консервирование, хранение, транспортировка и макроскопическая оценка годности крови

В клинической практике в зависимости от показаний применяют разнообразные трансфузионные среды: цельная кровь, свежестабилизированная, консервированная, компоненты крови, кровезаменители и другие.

Цельную кровь переливают непосредственно от донора к реципиенту с помощью аппаратов для прямого переливания крови.

Для непрямого переливания крови используется свежестабилизированная и консервированная кровь.

Консервирование крови - это создание условий для ее хранения в течение длительного срока в полноценном состоянии, пригодном для трансфузии. Существуют два практических метода хранения крови:

1. в жидком состоянии при температуре выше или ниже 0°С;

2. в замороженном твердом состоянии при температуре ниже 0°С (вплоть до ультранизких, обеспечивающих многолетнее хранение клеток крови).

Кровь, лишенная способности свертываться, называется стабилизированной. Стабилизация крови в несвернутом (жидком) состоянии достигается связыванием или разрушением одного из компонентов системы свертывания крови. Хорошо изучены и широко применяются в практике консервирования крови стабилизаторы, устраняющие ионы кальция. Наиболее приемлемым из большой группы анионов-стаби-лизаторов, связывающих ионный кальций, является цитрат натрия. На его основе приготовлены препараты ЦОЛИПК-7, ЦОЛИПК-76, ЦОЛИПК-12, Глюгицир, Цитроглюкофосфат, Циглюфад и др.

Представителем другой группы стабилизаторов, подавляющих действие тромбина, является гепарин. Срок хранения такой крови - до 24 часов.

При помощи катионообменной смолы можно консервировать кровь без использования антикоагулянтов. Для этой цели в систему для взятия крови включается небольшая ампула с катионитом. Кровь донора, протекая через катионообменную смолу, освобождается от кальция и не свертывается. Добавление электролитов, глюкозы и сахарозы позволяет хранить катионитную кровь в течение 20-25 дней.

В экстренных случаях при отсутствии консервированной крови можно в условиях операционной заготовить свежецитратную кровь с 4% раствором цитрата натрия. Ее переливают не позднее двух часов после эксфузии, так как она легко инфицируется.

Заслуживает внимания заготовка крови при ультранизкой температуре (-196°С). Для консервации эритроцитов крови человека применяют два метода замораживания: 1. очень быстрое охлаждение (250 мл в течение 2 мин до -196°С) и хранение в жидком азоте (при температуре -196°С), не требующее применения больших концентраций криозащитных веществ; 2. медленное охлаждение, при котором замерзание длится несколько часов при умеренно низких температурах (от -25° до -100°С) с применением больших концентраций криозащитных веществ (в основном глицерина в составе ограждающих растворов).

Оба метода позволяют сохранять после оттаивания неповрежденными 90-97% замораживаемых эритроцитов в зависимости от применяемых методов. Хранение эритроцитов в течение 10 лет и более в замороженном состоянии почти не влияет на степень их структурной сохранности, т.е. на биохимические параметры и приживаемость в кровяном русле реципиента.

При консервации крови должны быть обеспечены: 1. апирогенность консервированной крови; 2. отсутствие в ней сгустков и гемолиза (безупречная техника пункции вен донора, осторожное покачивание сосуда во время взятия крови); 3. стерильность (закрытый метод взятия крови, боксированная операционная, надежная герметизация сосуда с консервированной кровью).

Включение в состав консервирующих растворов хинина (с концентрацией его в крови 0,02%) удлиняет срок хранения крови до 45-50 дней. Добавление в консервант антицитолизирующих веществ (дипразин, этизин и др.) позволяет консервировать кровь в течение 60-70 дней. Следует строго соблюдать условия хранения трансфузионных сред. Флаконы герметизируют путем парафинизации горлышка или заливкой специальной пастой (металлекс): горлышко флакона 2-3 раза опускают в расплавленный парафин, находящийся в водяной бане (t не более 90°С). После парафинизации на горлышко флакона надевают колпачок из вощеной бумаги или марли, который укрепляют ниткой или резиновым кольцом. Если горлышко флакона закрывается марлевым колпачком, то проводят повторную парафинизацию.

Пластикатные мешки герметизируют запаиванием трубки при помощи токов высокой частоты (аппарат Гематрон) или завязывают трубки с находящейся в ней кровью узлами на расстоянии 3 и 6 см от мешка и у самой иглы. Конец трубки завертывают вощаной бумагой или пластикатной пленкой, которую укрепляют нитью. Оставшаяся в трубке кровь в дальнейшем используется для лабораторных анализов.

Консервированная кровь, ее компоненты, препараты (фибриноген, тромбин, альбумин и иммуноглобулин), стандартная сыворотка и эритроциты содержат в холодильниках при температуре 4-8°С. При наличии большого запаса крови целесообразно иметь отдельный холодильник для каждой группы крови. Сухая плазма, препараты из крови, кровезаменители, трансфузионные пластикатные системы хранятся при комнатной температуре (+15-25°С) в шкафах. Замороженный криопреципитат и гипериммунная плазма хранятся в условиях низкотемпературной камеры (температура -25°С и ниже).

Холодильники для хранения трансфузионных сред должны быть снабжены термометрами. Температура в холодильных камерах измеряется ежедневно 2 раза в сутки и регистрируется в специальном журнале.

Транспортировка крови: с целью уменьшения механической травматизации крови флаконы должны быть заполнены до горла, помещены вертикально в гнездах специальных сеток-корзинок, которые затем устанавливают в термостатистические (изотермические) контейнеры. Контейнеры типа ТКМ-14, ТКМ-7, ТКМ-5, ТКМ-3 (внутри них создают температуру от +4 до +8°С) крепятся в транспорте жестко, а по прибытии на основную базу, флаконы сразу же извлекают из гнезд сеток и помещают в рефрижераторы или холодильные камеры.

Пластикатные мешки укладывают в картонные коробки, которые также помещают в изотермические контейнеры. Флаконы или мешки с резус-положительной кровью укладывают отдельно от резус-отрица-тельной.

Непосредственно перед переливанием крови для предупреждения развития трансфузионных реакций и осложнений врач обязан провести визуальную оценку годности трансфузионной среды, предназначенной для переливания больному, а также проверить герметичность укупорки сосуда с кровью, наличие оформленной этикетки с указанием срока годности и групповой принадлежности, отсутствие в ней сгустков, гемолиза и инфицирования. О дефекте герметичности можно судить по появлению трещин в стекле, нарушению укупорки сосуда, особенно просачивание крови. Кровь до осмотра не должна быть взболтана, необходимо хорошее освещение. Гемолиз проявляется появлением розовой окраски плазмы и исчезновением четкой границы между слоем эритроцитов и плазмы, которая характерна для доброкачественной крови. Если кровь взболтана, то следует взять 5 мл крови и отцентрифугировать ее. Розовый, а тем более красный цвет плазмы указывает на гемолиз.

Выявление в консервированной крови сгустков, особенно массивных, служит основанием для отказа от ее использования. С целью предупреждения попадания в кровь мельчайших сгустков необходимо для переливания крови использовать систему с фильтром. Инфицирование крови, плазмы точно определяют бактериологическим исследованием, однако массивное бактериальное загрязнение заметно на глаз. Плазма становится мутной, в ней появляются взвесь, хлопья, белесоватые пленки на поверхности. Слой эритроцитов принимает темно-вишневую окраску. В некоторых случаях Инфицирование ведет к раннему гемолизу или превращению крови в желеобразную массу с неприятным запахом и выделением пузырьков газа при проколе пробки.

Таким образом, доброкачественная кровь, находящаяся в ампуле, в покое делится на три слоя: на дне - слой эритроцитов; сразу над ним - очень тонкий слой лейкоцитов и сверху - слой прозрачной, слегка желтоватой плазмы.

2. Контрольные исследования при проведении проб на совместимость перед гемотрансфузией. Предупреждение несовместимости перед переливанием.

Причины несовместимости и меры ее предупреждения.

Если реципиенту, в крови которого имеются антитела, перелить кровь донора, эритроциты которого содержат антигены, против которых направлены эти антитела, такая кровь будет разрушаться в организме реципиента, т.е. она является для него несовместимой.

Перед переливанием крови врач должен убедиться в том, что предназначенная, для переливания кровь не содержит антигенов, против которых в крови больного имеются антитела, т.е. совместима с кровью реципиента.

Для того, чтобы не допустить переливания несовместимой крови и следующих за этим клинических проявлений несовместимости, врач переливающий кровь, обязан:

- правильно выбрать кровь в отношении групп крови системы АВО;

- правильно выбрать кровь в отношении резус - принадлежности;

- проверить всю относящуюся к этому документацию;

- произвести контрольные исследования, включающие пробы на совместимость.

Врач должен также учесть, что кроме нормально существующих антител системы АВО - а и β имеющих большое практическое значение изоиммунных антител антирезус - D, у реципиента, хотя и значительно реже, могут встретиться антитела к другим антигенам эритроцитов: C, E, c, e, C_w, K, F_y, J_k, M, N, S, s и др.

Предупреждение несовместимости по отношению к этим антигенам, так же как и в отношении антигена D должно, в первую очередь, служить тщательное выявление прививочного, трансфузионного и акушерско-гинекологического анамнеза. Кроме того, несовместимость к некоторым из них может быть установлена при проведении проб на совместимость.

StudFiles.ru

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ

РАЗДЕЛ IV

РЕАНИМАЦИЯ И НЕОТЛОЖНАЯ ПОМОЩЬ

ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ И ЕЕ КОМПОНЕНТОВ

При переливании консервированной крови, эритроцитарной массы, отмытых эритроцитов врач, производящий трансфузию, обязан, неза висимо от проведенных ранее исследований и имеющихся записей, лично провести следующие контрольные исследования:

1)определить групповую принадлежность крови реципиента по сис теме АВО и сверить результат с данными истории болезни;

2)определить групповую принадлежность эритроцитов донора и со поставить с данными на этикетке контейнера с кровью;

3)провести пробы на совместимость в отношении групп крови до нора и реципиента по системе АВО и резус-фактору;

4)провести биологическую пробу.

Групповая принадлежность крови определяется при помощи стан дартных сывороток. В основе определения лежит реакция изогемагглютинации, т.е. реакция агглютинации испытуемых эритроцитов с известной сывороткой, содержащей антитело.

Для определения группы крови по системе АВО используются стан дартные гемагглютинирующие сыворотки групп: 0(1), А(М), В(Ш) двух се рий. Кровь берут из пальца или вены. Определение проводят на белой пластинке с обозначениями 0(1), А(И), В(Ш). Под соответствующее обо значение группы крови наносят по 2-3большие капли сывороток двух серий. Исследуемую кровь наносят рядом с каждой каплей сыворотки, по одной маленькой капле, приблизительно в10-20раз меньше капли сыворотки. Кровь тщательно перемешивают с сывороткой стеклянной палочкой или углом предметного стекла, которые промывают и досуха вытирают перед размешиванием каждой капли.

Наблюдение за ходом реакции производят при легком покачивании тарелки в течение 5 минут. Результат реакции в каждой капле может быть:

—положительным (+) — выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов; агглютинаты видны невооруженным глазом сначала в виде мелких красных зернышек, постепенно сливающихся в более крупные хлопья; при этом сыворотка постепенно обесцвечивается;

—отрицательным (-)— капля остается окрашенной в равномерно розовый цвет.

Реанимация и неотложная помощь

Агглютинация наступает обычно в течение первых 10-30с, однако, наблюдение производят не менее 5 минут ввиду возможности позднего наступления агглютинации в случае слабой агглютинабельности эрит роцитов. По мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минут, в эти капли добавляют по одной большой капле физиологического раствора NaCi для разрушения иногда наступающей ложной агглютина ции — неспецифического склеивания эритроцитов в так называемые “монетные столбики” .

В тех случаях, когда положительный результат получается со стан дартными сыворотками всех групп (во всех каплях), для исключения неспецифической агглютинации производится дополнительное иссле дование испытуемых эритроцитов со стандартной сывороткой группы АВ(IV), не содержащей групповых агглютининов. Лишь отсутствие аг глютинации с сывороткой группы AB(IV), не содержащей групповых аг глютининов, позволяет учесть положительный результат реакции с сы воротками 0(1), А(И) и В(1И) как истинный.

Оценка результата

1)Если нет реакции агглютинации ни в одной из трех групп, то кровь группы 0(1).

2)Если агглютинация в каплях 0(1) и В(Ш) — кровь группы А(Н).

3)Если агглютинация в каплях 0(1) и А(Н), то кровь группы В(III).

4)Если агглютинация во всех трех каплях при отсутствии агглютина ции с сывороткой AB(IV) — кровь группы AB(IV).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА

Стандартный универсальный реагент антирезус не содержит груп повых агглютининов А и В и поэтому может быть использован для оп ределения резус-антигенаD в эритроцитах любой группы системы АВО. Для контроля активности и специфичности реагента антирезус необходимо одновременно с основным исследованием ставить кон троль, используя стандартныерезус-положительныеирезус-отрица-тельные эритроциты. Исследуемая кровь может быть взята непосредст венно из места укола, консервированная кровь и осадок эритроцитов в пробирке после образования сгустка крови, взятой без стабилизатора.

Техника. В штатив устанавливают два ряда пробирок, по числу ис следуемых эритроцитов в каждом ряду, и по две пробирки для кон трольных исследований. На пробирках надписывают фамилии и ини циалы лиц, кровь которых исследуется.

Во все пробирки первого ряда вводят по две капли (0,1 мл) стан дартного универсального реагента антирезус. Во все пробирки второго ряда вводят по две капли (0,1 мл) изотонического раствора NaCI и по одной капле (0,05 мл) 33% раствора полиглюкина. Второй ряд служит контролем для исключения возможной неспецифической агглютинации

54	Практические навыки по педиатрии

исследуемых эритроцитов, например, за счет аутоантител. В каждую пару одинаково обозначенных пробирок вводят согласно маркировке по одной капле (0,05 мл) исследуемой крови (эритроцитов) и стандарт ные резус-положительные(Rh+) ирезус-отрицательные(Rh-)эрихроциты. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием и затем медленно поворачивают по оси, наклоняя почти до горизонтального положения так, чтобы содержимое растекалось по стенкам пробирки. Такое размазывание крови по стенкам пробирки делает реакцию более выраженной.

Как правило, агглютинация эритроцитов наступает уже в течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса антигенантитело и четко выраженной реакции при слабо выраженной агглютинабельности эритроцитов с реагентом поворачивание пробирок прово дят не менее трех минут. Через 3 минуты в пробирки добавляют 2-3мл изотонического раствора NaCi и перемешивают содержимое путемдвух-трехкратногопереворачивания пробирок (не встряхивать!).

Т рактовка результатов. Пробирки просматривают на свет нево оруженным глазом или через лупу. Результат трактуют по наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов. При наличии агглютинации в виде крупных комочков или хлопьев из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости исследуемую кровь относят крезус-положи-тельной (Rh+). При отсутствии агглютинации (в пробирке сохраняется гомогенное окрашивание) исследуемую кровь можно считатьрезус-от-рицательной(Rh-).

Однако эти результаты можно учитывать как истинные только после проверки контрольных образцов, т.е. при положительной реакции со стандартными резус-положительнымиэритроцитами и отрицательной — со стандартнымирезус-отрицательнымиэритроцитами, а также после просмотра результатов во втором (контрольном) ряду. Во всех пробир ках контрольного ряда агглютинации быть не должно.

Наличие агглютинации эритроцитов во втором (контрольном) ряду указывает на неспецифическое склеивание эритроцитов, например, за счет аутоантител и, следовательно, положительный результат с сыво роткой антирезус не может быть учтен как истинный.

Для определения резус-принадлежностив таких случаях следует применять другую активную сыворотку антирезус с полными антитела ми или предварительно отмытые эритроциты теплым изотоническим раствором NaCi для удаления с них аутоантител.

StudFiles.ru