Определение протромбинового времени

8. Определение протромбинового времени.

Протромбиновый тест Квика характеризует процесс свёртывания крови при его запуске по внешнему механизму и имеет исключительное значение для определения активности фактора VII.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: раствор тромбопластина (стандартный); 3,8% раствор цитрата натрия; 0,5% раствор хлорида кальция; капилляр Панченкова; пробирка, водяная баня или водяной термостат, поддерживающий температуру 37º С; секундомер.

ХОД РАБОТЫ: В капилляр Панченкова набирается раствор цитрата натрия до отметки «80», производится прокол пальца и в тот же капилляр (не удаляя цитрат натрия) набирается кровь, пока уровень набранной смеси не достигнет метки «0» («К»). Содержимое капилляра переносится в пробирку, которая помещается в водяную баню на 1 минуту. В пробирку с цитратной кровью вносится раствор тромбопластина капилляром Панченкова, заполненным до метки «0» («К»), и такое же количество раствора хлорида кальция. Включается секундомер. Пробирка в водяной бане осторожно покачивается. Секундомер останавливается в тот момент, когда образуется сгусток крови. Полученное значение – «протромбиновое время» (ПВ).

Зная ПВ испытуемого (ПВИ) и нормальное протромбиновое время (ПВН), которое зависит от активности стандартного тромбопластина (оно бывает указано на флаконе, обычно 12 – 18 секунд; проверяется на нескольких образцах донорской крови), можно рассчитать протромбиновый индекс (ПИ): ПИ = ПВН / ПВИ * 100.

В норме ПИ составляет 90-100%. Чем больше протромбиновое время, свидетельствующее о гипокоагуляции крови, тем меньше значения протромбинового индекса.

9. Тромбоэластография.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: тромбоэластограф, секундомер, принадлежности для взятия крови.

Тромбоэластограф – прибор для регистрации процесса свёртывания крови по внутреннему механизму. Используется для динамического контроля лечения антикоагулянтами. Основной частью тромбоэластографа является кювета, в которую вносят исследуемую кровь. В кювету погружают стержень с диском или пластиной на конце, которая не касается ее стенок. Стержень связан с регистрирующим устройством тромбоэластографа. Специальное устройство придает кювете колебательно-вращательные движения, которые передаются на стержень и регистрирующее устройство только в том случае, когда в кювете, заполненной кровью, начнется образование нитей фибрина. По мере образования и уплотнения сгустка амплитуда колебаний стержня увеличивается и достигает максимума.

Тромбоэластография.

А – схема прибора;

Б – тромбоэластограмма (ТЭГ):

В – начало реакции,

r- показатель времени реакции,

К – время образования сгустка,

а – величина,

определяющая

эластичность сгустка в норме,

аmax- максимальное расхождение между краями ТЭГ.

r– момент от начала записи до расхождения краев ТЭГ на 1мм. Характеризует I и II фазы процесса свертывания (9 – 14 мин.).

K - момент от конца времени реакции до расхождения краев линии ТЭГ на 20 мм. Зависит от концентрации образующегося тромбина и количества фибриногена (5 – 8 мин.).

r+ K- общая (видимая) длительность свертывания.

t(константа свертывания крови) - измеряется от конца периода К до аmax и соответствует периоду от конца видимого свертывания крови до начала ретракции кровяного сгустка.

аmax- в этот момент сгусток обладает максимальной плотностью. На показатель влияют концентрация фибриногена, количество и качество тромбоцитов. При резком снижении числа тромбоцитов и выраженной гипофибриногенемии показатель уменьшается. (N = 41 – 55 мм).

Е (коэффициент эластичности) - вычисляется по формуле: Е = (100* аmax) / (100- аmax)

Для гиперкоагуляции крови характерно укорочение r, К и увеличение аmax; для гипокоагуляции - удлинение r и К и уменьшение аmax.

Рассмотреть и проанализировать несколько тромбоэластографических кривых, сделать вывод об их соответствии норме. Нормальные величины показателей ТЭГ устанавливают эмпирически для каждого тромбоэластографа.

Показатели ТЭГ

Нормальные величины ТЭГ

ТЭГ 1

ТЭГ 2

ТЭГ 3

r

21 – 35 мм

K

15 – 24 мм

t

50 – 83 мм

аmax

41 – 55 мм

Е

69 – 117 у.е.

Выводы по ТЭГ:

StudFiles.ru

Протромбиновое время это:

Протромбиновое время

Протромбиновое время (ПТВ) и его производные протромбиновый индекс (ПТИ) и международное нормализованное отношение (МНО) — лабораторные показатели, определяемые для оценки внешнего пути свёртывания крови. Используются при оценке системы гемостаза в целом, эффективности терапии варфарином, степени нарушения печеночной функции (синтеза факторов коагуляции), степени насыщения витамином К. ПТВ позволяет оценить активность факторов свертывания I, II, V, VII и X. Зачастую определяется вместе с показателем активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), которое оценивает внутренний путь свертывания крови.

Содержание

  • 1 Лабораторное измерение
    • 1.1 Нормальное значение
    • 1.2 Методология
  • 2 Протромбиновый индекс
  • 3 Международное нормализованное отношение
  • 4 Интерпретация
  • 5 Факторы, влияющие на точность
  • 6 Статистика
  • 7 Экспресс-определение
  • 8 См. также
  • 9 Примечания

Лабораторное измерение

Нормальное значение

Нормальный показатель протромбинового времени — 11-16 секунд, для МНО — 0,8-1,2. При терапии пероральными антикоагулянтами (варфарином) требуется более высокий целевой уровень МНО — обычно в диапазоне 2-3[1].

Методология

При определении протромбинового времени чаще всего используется плазма крови. Кровь набирается в пробирку с цитратом натрия, который действует как антикоагулянт, связывая кальций в образце крови. Кровь осторожно перемешивается, затем центрифугируется для отделения клеток крови от плазмы. У новорожденных для анализа используется цельная кровь [2] Далее анализ выполняется автоматически при температуре 37 С. К образцу плазмы добавляется избыток кальция (таким образом, нейтрализуется эффект цитрата), что возвращает способность плазмы к свёртыванию. Для точного измерения пропорция крови и цитрата в пробирке должна быть фиксированной (обычно используется соотношение 9:1). Многие лаборатории отказываются выполнять анализ если пробирка заполнена кровью не до конца — и таким образом содержит относительно большой объем цитрата. Далее к плазме с кальцием добавляется тканевой фактор (также известен как III фактор свертывания крови) и засекается время до образования сгустка, что определяется при оптическом измерении. В некоторых лабораториях используется механическое определение момента образования сгустка, что позволяет более точно определять ПТВ в случае большого количества жировых капель в плазме и при гипербилирубинемии.

Протромбиновый индекс

— рассчитывается как отношение ПТВ контрольной плазмы к ПТВ исследуемой плазмы пациента, выражается в процентах.

Международное нормализованное отношение

Результаты протромбинового времени у здоровых индивидумов варьируют в зависимости от типа реагента — тканевого фактора (тромбопластина), используемого в разных лабораториях. Показатель МНО был введен в клиническую практику, чтобы стандартизировать результаты теста ПТВ. Производители реагента (тканевого фактора) для теста ПТВ обязаны указывать МИЧ (международный индекс чувствительности) для реагентов. МИЧ показывает активность тканевого фактора в данной произведенной партии реагента в сравнении со стандартизованным образцом. Значение МИЧ обычно между 1,0 и 2,0. МНО рассчитывается — как отношение ПТВ пациента к нормальному ПТВ, возведенное в значение МИЧ использованного при тесте реагента. МНО= (ПТВ пациента/ПТВ норма)МИЧ

Интерпретация

Протромбиновое время — это время образования сгустка после добавления в плазму тканевого фактора (реагент получают из тканей животных). Данный показатель позволяет оценить внешний и общий пути свертывания крови. Скорость коагуляции крови по внешнему пути сильно зависит от концентрации VII фактора свертывания крови. VII фактор — белок с короткой продолжительностью жизни, для его синтеза необходим витамин К. ПТВ может быть удлинено в результате дефицита витамина К, возникающего при применении варфарина (желательный клинический эффект), при синдроме мальадсобции, при недостаточной бактериальной колонизации кишечника (например у новорожденных). Кроме того недостаточная концентрация VII фактора может наблюдаться при заболеваниях печени (нарушение синтеза), или повышенном потреблении фактора (ДВС-синдром), что также удлиняет ПТВ. При МНО выше 5,0 — наблюдается высокий риск кровотечения, при МНО ниже 0,5 — высокий риск тромбообразования. Нормальные значения МНО у здоровых индивидуумов от 0,8 до 1,3. При терапии варфарином — целевой уровень МНО 2,0-3,0, хотя в отдельных случаях, например при наличии искусственного механического клапана сердца, в периоперационный период может потребоваться более высокий целевой уровень МНО.

Состояние ПТВ АЧТВ Время кровотечения Тромбоциты
дефицит витамина К или терапия варфарином Удлинено Без изменений
ДВС-синдром Удлинено Удлинено укорочено или норма Удлинено Снижены
Болезнь Виллебранда Не изменено Удлинено Не изменено
Гемофилия Не изменено Удлинено Не изменено
Терапия аспирином Не изменено Удлинено Не изменено
Тромбоцитопения Не изменено Удлинено Снижены
Печеночная недостаточность (ранняя стадия Удлинено Не изменено Не изменено
Печеночная недостатоность (поздняя стадия) Удлинено Удлинено Снижены
Уремия Не изменено Удлинено Не изменено
Врожденная афибириногенемия Удлинено Удлинено Не изменено
Дефицит фактора V Удлинено Не изменено
Дефицит фактора X Удлинено Не изменено

.

Факторы, влияющие на точность

Волчаночный антикоагулянт, циркулирующий ингибитор, предрасполагающий к тромбозу, влияет на результаты ПТВ в зависимости от используемой методики. Вариации активности реагента (тканевого фактора) приводят к снижению точности МНО,несмотря на попытки международной стандартизации ПТВ (введения МНО) в 2005 году все еще сохранялись значительные различия в показателях, определяемых в разных лабораториях.

Статистика

Ежегодно в мире выполняется около 800 млн анализов МНО/ПТВ.

Экспресс-определение

Кроме лабораторного метода определения МНО, описанного выше, экспресс-метод, позволяющий мониторировать МНО в домашних условиях, становится все более популярным. Новое поколение устройств и реагентов для экспресс-тестов позволяют получать результаты, близкие по точности к лабораторным. Обычно в домашних условиях используют портативные устройства, например Коагучек Роше (Roche Coaguchek S) или Гемосенс МНО (HemoSense INRatio).

См. также

  • Тромбоэластография
  • Тест генерации тромбина (тромбиновый потенциал, эндогенный тромбиновый потенциал)
  • Тромбодинамика
  • Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ)

Примечания

  1. Warfarin Therapy Management in Adults. Архивировано из первоисточника 27 июля 2012.
  2. Fritsma, George A. «Evaluation of Hemostasis.» Hematology: Clinical Principles and Applications . Ed. Bernadette Rodak. W.B. Saunders Company: Philadelphia, 2002. 719-53. Print

Анализ прямых затрат ассоциированных с применением варфарина у пациентов с фибрилляцией предсердий

Категории:
  • Гематология
  • Кровь

Wikimedia Foundation. 2010.

dic.academic.ru

Протромбиновое время

Скрининговый тест на основе АЧТВ для оценки антикоагулянтной активности протеина С

Антикоагулянтная активность протеина С, связанная с ингибированием активных факторов Villa и Va, рассматривается в последнее время как один из основных физиологических барьеров про­тив тромбоза. Поэтому определение резистентно-сти к активированному протеину С (РАПС) -один из самых первых подходов при выявлении индивидуального риска тромбоза. Наиболее ре-


альным скрининговым тестом для определения РАПС является постановка АЧТВ в условиях предварительной активации протеина С актива­тором из змеиного яда с фирменным названием Protac® (см. ниже). Чувствительность теста к фак­тору Лейден и дефициту протеина С близка к 100%. Тест с Protac® может нарушаться также при наличии волчаночного антикоагулянта, мутации протромбина 20210G—>A или повышенной актив­ности ф.УШ:С (> 150%).


3) протромбиновое отношение (ПО), которое определяется как

Протромбиновое время (ПВ) - широко ис­пользуемый скрининговый тест для оценки внеш­него каскада свертывания плазмы. ПВ обычно используется для определения активности ф.УП, контроля за лечением непрямыми антикоагулян­тами, при скрининге системы гемостаза, редко для количественного определения фибриногена (в автоматических коагулометрах, имеющих спе­циальную программу).

ПВ удлиняется при:

• дефиците факторов VII, X, V, протромбина и
фибриногена, в том числе при тяжелых забо­
леваниях печени, при наличии аутоантител
против факторов свертывания. Чувствитель­
ность к недостатку протромбина и фибрино­
гена в тесте ПВ меньше, чем к недостатку дру­
гих вышеперечисленных факторов;

• иногда в присутствии волчаночных антикоа­
гулянтов.

Несколько типов реагентов для постановки ПВ используется в КДЛ:

Рекомбинантные ПВ-реактивы
Рекомбинантный тканевой фактор, Са2+, фос-
фолипиды, буфер, стабилизаторы.

Тканевые тромбопластины

Экстракты тканей, богатые тканевым тром-бопластином (печень, мозг кролика, быка, свиньи, плацента человека).

Комбинированные тромбопластины
Тканевой тромбопластин, разведенный в ра­
створе фибриногена быка; его целесообраз­
но использовать при контроле за лечением не­
прямыми антикоагулянтами.

Реактивы могут отличаться по нескольким показателям: чувствительностью, реактивностью


к гепарину, разной активностью по свертыванию контрольной плазмы, характеризоваться межсе­рийными колебаниями. Свертывание в тесте ПВ не должно быть

Для представления результатов ПВ в разное время предлагалось использовать:



1) время свертывания в секундах;

2) протромбиновый индекс (ПИ), который оп­
ределяется как

4) ПТ по Квику - % от нормы, которая опреде­
ляется по калибровочному графику;

5) международное нормализованное отношение
(MHO), которое представляет собой ПО, воз­
веденное в степень Международного индек­
са чувствительности (МИЧ):

Первые три выражения, хотя и представля­ются в виде цифр, но из-за отсутствия калибров­ки являются, по сути, качественными показате-


Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ


лями с неопределенным масштабом. Кроме того, существенным недостатком определения про-тромбинового времени в секундах является низ­кая воспроизводимость из-за использования не-стандартизованного тромбопластина. Поэтому нельзя сопоставлять результаты у одного паци­ента, полученные в разных лабораториях, на раз­ных приборах или с тест-наборами разных серий. Выражение ПИ в процентах не несет смысловой нагрузки и путает врачей, так как между количе­ством факторов и измерением ПВ в секундах нет прямой пропорциональной зависимости.

Два последних выражения для ПВ являются взаимодополняющими.

studopedia.ru

Протромбиновое время


3) протромбиновое отношение (ПО), которое определяется как

Протромбиновое время (ПВ) - широко ис­пользуемый скрининговый тест для оценки внеш­него каскада свертывания плазмы. ПВ обычно используется для определения активности ф.УП, контроля за лечением непрямыми антикоагулян­тами, при скрининге системы гемостаза, редко для количественного определения фибриногена (в автоматических коагулометрах, имеющих спе­циальную программу).

ПВ удлиняется при:

• дефиците факторов VII, X, V, протромбина и
фибриногена, в том числе при тяжелых забо­
леваниях печени, при наличии аутоантител
против факторов свертывания. Чувствитель­
ность к недостатку протромбина и фибрино­
гена в тесте ПВ меньше, чем к недостатку дру­
гих вышеперечисленных факторов;

• иногда в присутствии волчаночных антикоа­
гулянтов.

Несколько типов реагентов для постановки ПВ используется в КДЛ:

Рекомбинантные ПВ-реактивы
Рекомбинантный тканевой фактор, Са2+, фос-
фолипиды, буфер, стабилизаторы.

Тканевые тромбопластины

Экстракты тканей, богатые тканевым тром-бопластином (печень, мозг кролика, быка, свиньи, плацента человека).

Комбинированные тромбопластины
Тканевой тромбопластин, разведенный в ра­
створе фибриногена быка; его целесообраз­
но использовать при контроле за лечением не­
прямыми антикоагулянтами.

Реактивы могут отличаться по нескольким показателям: чувствительностью, реактивностью


к гепарину, разной активностью по свертыванию контрольной плазмы, характеризоваться межсе­рийными колебаниями. Свертывание в тесте ПВ не должно быть

Для представления результатов ПВ в разное время предлагалось использовать:



1) время свертывания в секундах;

2) протромбиновый индекс (ПИ), который оп­
ределяется как

4) ПТ по Квику - % от нормы, которая опреде­
ляется по калибровочному графику;

5) международное нормализованное отношение
(MHO), которое представляет собой ПО, воз­
веденное в степень Международного индек­
са чувствительности (МИЧ):

Первые три выражения, хотя и представля­ются в виде цифр, но из-за отсутствия калибров­ки являются, по сути, качественными показате-


Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ


лями с неопределенным масштабом. Кроме того, существенным недостатком определения про-тромбинового времени в секундах является низ­кая воспроизводимость из-за использования не-стандартизованного тромбопластина. Поэтому нельзя сопоставлять результаты у одного паци­ента, полученные в разных лабораториях, на раз­ных приборах или с тест-наборами разных серий. Выражение ПИ в процентах не несет смысловой нагрузки и путает врачей, так как между количе­ством факторов и измерением ПВ в секундах нет прямой пропорциональной зависимости.

Два последних выражения для ПВ являются взаимодополняющими.

studopedia.ru

Протромбиновое время

Протромбиновое время (ПВ) – широко используемый скрининговый тест для оценки внешнего каскада свертывания плазмы. ПВ обычно используется для определения активности ф. VII, контроля за лечением непрямыми антикоагулянтами, при скрининге системы гемостаза, а также для количественного определения фибриногена в автоматических коагулометрах. Результаты определения протромбинового времени могут быть представлены в различной форме (табл.3).

Референсные значения ПВ: 9,2-12,2 с

УКОРОЧЕНИЕ ПВ:

  • активация внешнего механизма свертывания при различных видах внутрисосудистого свертывания крови;

  • последние недели беременности, прием пероральных контрацептивов;

  • лечение концентратами факторов протромбинового комплекса («Фейба», «НовоСевен» и др.).

УДЛИНЕНИЕ ПВ:

  • дефицит или аномалия факторов протромбинового комплекса (VII, X, V,II) в случаях приема антикоагулянтов непрямого действия (варфарин, синкумар, пелентан и др.);

  • болезни печени и желчевыводящей системы;

  • лечение нефракционированным гепарином (тест реагирует лишь на сравнительно высокие концентрации антикоагулянта, примерно от 0,5 МЕ/мл крови и выше);

  • ДВС-синдром (потребление факторов свертывания в переходную фазу и фазу гипокоагуляции);

  • на фоне переливаний реополиглюкина, препаратов гидроксиэтилкрахмала (инфукол, валекам, НЕS);

  • наличие в крови волчаночного антикоагулянта (возможно);

  • дефекты при получении крови для исследования (гемолиз, передозировка цитрата натрия, забор крови из гепаринизированного катетера).

Тромбиновое время

Тромбиновое время (ТВ) – определение тромбинового времени является третьим по значимости базисным скрининговым тестом. Тест характеризует конечный этап процесса свертывания – превращение фибриногена в фибрин под действием тромбина, на него влияет концентрация фибриногена в плазме и наличие продуктов деградации фибрина.

Референсные значения ТВ: 18-24 с

УКОРОЧЕНИЕ ТВ:

  • гиперфибриногенемия (фибриноген 6,0 г/л и выше);

  • начальная (гиперкоагуляционная) фаза острого и подострого ДВС-синдрома.

УДЛИНЕНИЕ ТВ:

  • гепаринотерапия обычным гепарином (тест реагирует на сравнительно низкие концентрации антикоагулянта, приблизительно от 0,05 МЕ/мл крови)

  • гипофибриногенемия (фибриноген ниже 1,0 г/л) в случаях развития острого ДВС-синдрома и при тромболитической терапии (стрептокиназа, актилизе и др.). В последнем случае  конечный этап свертывания крови ингибируется продуктами деградации фибриногена и фибрина (фрагментами D и D-димеров)

  • влияние других ингибиторов полимеризации фибрин-мономера (парапротеины, миеломные белки и др.)

  • дефекты при получении крови для исследования (гемолиз, передозировка цитрата натрия, забор крови из гепаринизированного катетера)

Концентрация фибриногена в плазме

Количественное определение фибриногена по методу Клаусса является базисным тестом исследования гемостаза. Образование фибрина и его стабилизация представляют собой финальный этап формирования тромба, при котором растворимый фибриноген превращается в нерастворимый фибрин под действием тромбина и фактора XIII. Фибриноген – острофазный белок. Печень синтезирует 2–5 г фибриногена в день, время полувыведения фибриногена из крови составляет около 4 дней. Концентрация его может превышать 10 г/л при тяжелых бактериальных инфекциях, при травме и тромбозе. Повышение уровня фибриногена в острой фазе воспаления, как правило, имеет транзиторный характер. У курящих людей уровень фибриногена в плазме крови несколько выше, чем у некурящих. К значительному росту фибриногена приводят заболевания почек (пиелонефрит, гломерулонефрит, гемолитико-уремический синдром), коллагенозы (ревматоидный артрит, узелковый периартериит), пароксизмальная ночная гемоглобинурия, новообразования (рак легкого). При атеросклерозе наблюдается устойчивое увеличение уровня фибриногена, трудно корригируемое лекарственными препаратами. В результате риск сердечно-сосудистых заболеваний повышается с возрастанием исходного содержания фибриногена в интервале 3,0-4,5 г/л. Обнаружено, что повышение уровня фибриногена в плазме крови больных сердечно-сосудистыми заболеваниями предшествует развитию инфаркта миокарда и инсульта. Корреляция между уровнем фибриногена и развитием этих осложнений особенно четко прослеживается у пациентов молодого и среднего возраста. Определение уровня фибриногена – наиболее чувствительный тест для выявления бессимптомных стадий заболевания периферических артериальных сосудов.

Референсные значения фибриногена: 2,75- 3,65 г/л

СНИЖЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФИБРИНОГЕНА:

  • острый ДВС-синдром;

  • дисфибриногенемии.

ПОВЫШЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФИБРИНОГЕНА:

  • инфекционные, воспалительные и аутоиммунные процессы;

  • подострый и хронический ДВС-синдром;

  • нормально протекающая беременность.

StudFiles.ru

Читайте также